白血病的免疫分型 流式细胞术的基本概念流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM )是一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可以对特定群体加以分选研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合成微球等研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定量散射光信号和荧光信号前向角散射光(FSC, Forward Scatter )入射激光的前向散射光信号细胞相对大小及其表面积侧向角散射光(SSC, Side Scatter )入射激光90角的散射光信号细胞粒度及细胞内相对复杂性荧光素与特异抗体结合,荧光抗体与细胞抗原结合越多,产生的荧光信号越强。CD45/SS 示意图抗原分布• 表面, 胞浆, 核内• 是共同检测还是分别检测?表面胞浆核内CD3, CD4, CD8, tetramercytokinesDNACD3,4,8, tetramer+CytokinesCD3,4,8, tetramer+DNACytokines+DNACD3,4,8, tetramer+Cytokines+DNA设门08-03307设门全部 细胞门内细胞08-03307血液肿瘤分类进程白血病免疫分型的理论基础 白血病/ 淋巴瘤免疫分型采用的抗原标志是表达于正常造血细胞不同分化发育阶段的分化抗原。虽然是恶性肿瘤细胞,但仍能表达正常血细胞所具有的抗原,因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病/ 淋巴瘤进行免疫分型。为了正确分析白血病/ 淋巴瘤细胞,必须对正常造血细胞分化抗原的表达模式有充分的了解。只有熟悉正常细胞的抗原表达模式,才能辨认白血病/ 淋巴瘤细胞的存在。 细胞类型鉴定Borowitz et al (1993) AJCP 100:534-40.Steltzer et al (1993) Ann NY Acad Sci 667:265-280CD45/SS 示意图正常骨髓细胞 血液肿瘤细胞老化粒细胞 、噬酸细胞 早幼—成熟粒细胞 M3 、CML单核细胞 M4 、M5 LGL淋巴细胞 CLL 、ALL 、CLD正常前体细胞 M0 、M1 、M2 、 嗜碱性粒细胞 M4 、M5 、ALL成熟红细胞、血小板 M6 、M7 、MM细胞碎片 Pre-B-ALL 非B 淋巴细胞分化与抗原表达关系图Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory MedicineT 淋巴细胞分化与抗原表达关系图Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine粒细胞分化与抗原表达关系图Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine单核细胞分化与抗原表达关系图Wood and Borowitz (2006) Henry’s Laboratory Medicine非肿瘤T 淋巴细胞表型非肿瘤B 淋巴细胞表型非肿瘤粒细胞、...