HIV 抗体检测原理和方法HIV 感染的实验室检测–常用HIV 病原学检测方法:– 病毒分离– 抗原检测– 核酸检测( cDNA 测定-PCR 、 RNA 测定- 病毒载量)– 其他方法:逆转录酶测定、原位杂交–常用HIV 抗体检测方法:– ELISA– 快速HIV 检测– 免疫印记法 ( Western Blot )– 其他方法:免疫荧光法(IFA )、放射免疫沉淀实验抗原检测的目的(一)检测早期感染,缩短窗 口期 (可提前1-2 周) HIV-P24 抗原阳性仅作为HIV感染窗口期的辅助诊断依据,不能据此确诊(二)新生儿的感染• 婴幼儿HIV 抗体阳性不能用于诊断感染HIV• 婴幼儿体内从母亲得到的HIV 抗体持续存在时间最长不超过18 个月。• 在18 月龄以前可以用多种不同的非抗体依赖性的检验方法对新生儿HIV 感染进行辅助诊断,包括:HIV P24 抗原检测、病毒分离培养、RNA 或DNA 测定。• 18 月龄以前婴幼儿感染HIV 诊断要结合临床表现和实验室综合诊断。抗体检测的目的• 输血和移植安全(为了接受者的安全)• 监测( 为了知晓人群流行状况)• 临床HIV 疾病的诊断 ( 为了知晓个体感染状况)• 为了达到以上的某个目的的HIV 检测可能不适合其他目的,比如输血服务的检测不适合临床诊断HIV 感染HIV 抗体检测 • HIV 抗体检测分为筛查试验(包括初筛和复 检)和确认试验(WB) 。• (一)检测试剂• 筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批检合格、临床评估质量优良、在有效期内的试剂。目前常用的筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。采供血机构进行血液筛查应采用HIV-1/2 混合型酶联免疫试剂。自采自供血的单位必须进行HIV抗体检测。(二)筛查方法• 1. 常用的筛查方法是酶联免疫试验(ELISA )目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂,少数使用第二代试剂。血源筛查仍以第三代ELISA 为主,国际上有些国家和地区已将线性免疫酶测定(第四代ELISA 试剂)用于血源筛查。第四代ELISA试剂是最近发展起来的HIV 抗原抗体联合测定试剂,可同时检测P24 抗原和抗HIV-1/2 抗体。与第三代抗HIV-1/2 试剂相比,检出时间提前了4-9.1d 。其优点在于能同时检测抗原抗体,降低血源筛查的残余危险度。酶联免疫吸附试验 Enzyme linked immunosorbent assay• ELISA 的原理 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗体或抗原的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标...